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​细菌培养实验室的规划设计

作者: 点击:1479 时间:2021-08-06

细胞培养是一项无菌技术,要求其操作环境和操作条件都要做到无菌化、无害化。为了防止微生物污染及有害因素的影响,要求实验室设计环境干净,空气清新、干燥、无尘。

细胞培养是一项无菌技术,要求其操作环境和操作条件都要做到无菌化、无害化。为了防止微生物污染及有害因素的影响,要求实验室设计环境干净,空气清新、干燥、无尘。

该细胞培养实验室由无菌操作区、孵育区、制备区、贮藏区、清洗消毒区6个部分组成,其共同特点是:房间宽敞、明亮,地面清洁防滑,墙壁纹理光滑,仪器设备布局合理,操作方便,避免交叉干扰。

​细菌培养实验室的规划设计

一、消毒操作区域。

无菌操作区是局限于细胞培养和其他无菌操作的区域,能与外界隔离,不能穿过或受到其他干扰。通常环境中空气中存在大量的尘埃和杂菌,极易造成污染。

所以接种工作要在经过空气消毒的环境中进行,超净工作台可以创造小规模的无菌环境,大量需要建立无菌室。

无菌室应该被划分成三个部分:

1.更衣间——可更换衣物、鞋子、帽子和面罩。

2.缓冲室——位于更衣室和操作室之间,是为了做好准备,防止污染,确保操作间的无菌环境,可放置恒温培养箱和必要的小型仪器。

3.无菌操作间——无菌操作间是专门用于无菌操作、细胞培养的,其大小要合适,且顶部不宜过高,以保证紫外线;墙壁光滑、无菌操作间可进行清洗和消毒,无菌操作间容积小且为密闭式,一般无菌操作间的空气消毒用紫外线灯,不能太高;墙壁光滑,以便清洗和消毒,无菌操作间为密闭式,一般无菌操作间使用。

4.净化工作台:操作简单,安装方便,占地面积小,净化效果非常好。在普通细菌培养室中使用的净化工作台主要有两种:a)侧向流式或称垂直向流式。

​细菌培养实验室的规划设计

二、孵化区

孵化区也叫培养区,虽然这里的无菌要求并不比无菌区严格,但也需要洁净、无尘,因此,也应该设置在干扰少、不干扰的地方。孵化可在育雏室或温控温室中进行,后者费用较高,一般实验室多采用孵化箱。

三、备用区域

制备区主要用于培养液的制备和相关液体等。仪器柜、器械柜、实验台、上水道、电源等,主要仪器设备有水净化装置、天平、微波炉、pH计、抽气泵、电炉、培养分装器、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶等。

配制完毕后,在有天平、pH计、磁力搅拌器等设备下,应在无菌操作台中过滤。液相制备直接关系到组织细胞养的成败,必须严格无菌操作。

四、储藏区。

储存区主要储存各种类型的冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等,也要求清洁、无尘。要保存细胞,尤其是不容易被利用的变异类型或细胞株,应冻结细胞。冻结温度通常为液氮温度-196℃。

在4℃保存30min时,细胞的冷冻过程需要一系列的冷却程序。将-20℃1h转放,再转入-80~-70℃过夜,然后转至液氮内(-196℃)。所以储藏区域要有冰箱、低温冰箱、超低温冰箱、液氮罐等设备。​细菌培养实验室的规划设计

五、清洁及消毒区域。

清洗消毒区域应与其它区域分开,主要是所有细胞培养器的清洗、准备、消毒、三蒸水准备等工作,并应有高压蒸汽锅、细菌过滤装置、电热干燥箱、消毒柜、排风设备等。

六、建造细胞实验室设计的要求。

1、环境要求。

温度:仪器或操作时对温度没有特殊要求,保持舒适温度即可,如18~26度。

湿气:湿度过高会造成微生物的滋生,所以建议正常的湿度保持在70%以下。

清洁度:细胞实验对洁净区没有要求,细胞实验中只有细胞操作时需要无菌环境,此时要求有局部百级,一般可使用超净台或生物安全柜,但有时为了有一个更好的环境,减少超净台过滤器的更换时间,会维持室内的洁净度,比如万级的洁净度。

在体外培养中,无菌、无毒的操作环境和培养环境是细胞成功培养的关键。无菌环境对细胞培养有严格的要求,在操作细胞时,一般要在100级空气质量条件下进行。

被微生物或有毒物质污染,或自身代谢物质累积,会导致细胞中毒而死亡,因为它们缺乏对微生物和毒素的防御能力。

灯光:满足试验照度,一般为300LUX。

2、围护结构要求。

尽管实验操作对大环境没有特别的要求,但能有不产尘、不积尘的环境,能够保证室内清洁,而且容易清洗,不容易滋生微生物,所以在选择使用彩板、彩板等洁净材料时,选用彩板、彩板等洁净板材是比较好的选择,可以布置密闭窗。

​细菌培养实验室的规划设计

3、消毒。

一般做完实验后,需要进行终末消毒,室内需要安装紫外灯,利用紫外灯对空气和表面进行消毒。

六、应注意细胞实验室设计规划

1、放置细胞培养室,必须保证空调在冬季能进行制冷,特别是在密闭的环境中,培养箱等设备的散热会比较大,造成室内温度过高。

2、如果设计成净化实验室,需要按照净化实验室的要求来做,如果要做涉及生物安全的细胞,则必须按照生物安全实验室的要求来设计,具体要根据所做实验的种类,确定实验室的设计要求,以及所选择的设备,是要选择超净工作台还是生物安全柜。

3、在临床上进行细胞的,要根据具体的规范要求进行建设。

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